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    產品詳情
    • 產品名稱:小鼠肝實質細胞

    • 產品型號:BJ-X96322
    • 產品廠商:邦景
    • 產品文檔:
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    簡單介紹:
    小鼠肝實質細胞現貨供應,質量有保證、價格優惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供小鼠肝實質細胞價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
    詳情介紹:
    我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態、培養條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們專業您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!



    產品名稱:小鼠肝實質細胞

    產品英文:AML-12

    細胞培養條件:D/F12+10%FBS+1%ITS(10ug/mL胰島素;轉鐵蛋白5.5ug/mL; 5ng/mL硒)+40ng/ml地塞米松+1%P/S

    生長狀態:貼壁生長

    產品規格:1×106

    單位:T25/瓶

    是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告

    保存培養溫度(℃)37

    運輸溫度(℃):常溫


    細胞傳代步驟:
    如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。




    實驗要點及說明 :

    1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 

    2.所使用的蓋玻片應該為玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理; 

    3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 

    4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 

    5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

    培養操作:

    1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。天換液并 檢查細胞密度。

    2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。      

    1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  

    3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

    4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

    3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

    1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


    使用方法:

    收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

    1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

    2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

    3. 細胞傳代

    1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

    2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;

    3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

    4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

    實驗報告:

    一、分離與培養:

    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大??;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

    5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

    二、熒光鑒定:

    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    哥倫比亞瓊脂對照培養基 The control Columbia agar culture medium 13.2g/300ml 負20℃,避光

    綠膿菌素測定用對照培養基基礎 Pyocyanin determined by contrast medium base 13.9g/300ml 負20℃,避光

    顯色對照培養基 Candida color contrast medium 4.8g/100ml 負20℃,避光

    沙氏葡萄糖瓊脂對照培養基 Sabouraud dextrose agar control medium 19.5g/300ml 負20℃,避光

    沙門、志賀菌屬瓊脂對照培養基 Salmonella, Shigella Agar control medium 18.0g/300ml 負20℃,避光

    麥康凱瓊脂對照培養基 Mark Kang Kai agar control medium 15.6g/100ml 負20℃,避光

    款冬酮 Kuan Dongtong 20mg 負20℃,避光

    甘露醇氯化鈉瓊脂對照培養基 Mannitol and sodium chloride agar control medium 33.3g/300ml 負20℃,避光

    膽鹽乳糖對照培養基 Lactose bile control medium 3.6g/100ml 負20℃,避光

    玫瑰紅鈉瓊脂對照培養基 Rose bengal sodium agar control medium 9.0g/300mL 負20℃,避光

    營養肉湯對照培養基 Nutrient broth control medium 1.8g/100mL 負20℃,避光

    改良馬丁對照培養基 Modified Martin control medium 11.6g/400mL 負20℃,避光

    硫乙醇酸鹽流體對照培養基 Fluid thioglycollate control medium 11.9g/400mL 負20℃,避光

    頭孢曲松雜質C Ceftriaxone impurity C 50mg 負20℃,避光

    反式頭孢曲松 Trans of Qu Song 50mg 負20℃,避光

    阿奇霉素雜質J Azithromycin impurity J 50mg 負20℃,避光

    青霉胺二硫化物 Penicillamine two sulfide 30mg/支 負20℃,避光

    頭孢噻肟系統適用性對照品 Cefotaxime system suitability control products 30mg 負20℃,避光

    氨芐西林系統適用性對照品 Ampicillin system suitability control products 30mg 負20℃,避光

    頭孢哌酮雜質C Cefoperazone impurity C 100mg 負20℃,避光

    (左)氧氟沙星雜質E (left) ofloxacin impurity E 50mg 負20℃,避光

    鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T

    豬內源性逆轉錄病毒(PERV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬內源性逆轉錄病毒(PERV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T

    豬內源性逆轉錄病毒前病毒(PERV-pre)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬內源性逆轉錄病毒前病毒(PERV-pre)核酸檢測試劑盒 48T

    豬鏈球菌通用型(SS-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬鏈球菌通用型(SS-U)核酸檢測試劑盒 48T

    豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸檢測試劑盒 48T

    豬弓形蟲(TOX)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬弓形蟲(TOX)核酸檢測試劑盒 48T

    布氏桿菌(BS)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    布氏桿菌(BS)核酸檢測試劑盒 48T

    豬肺炎支原體(MHP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬肺炎支原體(MHP)核酸檢測試劑盒 48T

    西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    西尼羅河病毒(WNV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T

    豬托克特諾病毒(TTV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬托克特諾病毒(TTV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T

    豬腦心肌炎病毒(EMCV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬腦心肌炎病毒(EMCV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T

    豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T

    豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T

    豬流行性腹瀉病毒(PEDV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬流行性腹瀉病毒(PEDV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T

    小鼠肝實質細胞豬流感病毒通用型(SIV-U) 核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    豬流感病毒通用型(SIV-U) 核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T


    產品名稱 規格

    馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T




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